引物5撇端可以修饰，引物3撇端不可修饰，引物3撇端要避开密码子的第3位，引物设计需要注意的地方很多，在大多数情况下，我们都是在知道已知模板序列时进行PCR扩增的，序列特异性：引物设计完毕请使用NCBIBLAST功能检索引物特异性，以避免...

1、引物5’端可以修饰，引物5’端序列对PCR影响不太大，因此常用来引进修饰位点或标记物，验证引物的特异性：在“PrimerPairSpecificityCheckingParameters”区，选择设计引物或验证引物时的目标数据库...